LC-310高效液相色譜儀系統由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。液相色譜儀主要系統分為進(jìn)樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和數據處理系統。
LC-310高效液相色譜儀操作步驟及注意事項:
操作步驟:
1) . 過(guò)濾流動(dòng)相,根據需要選擇不同的濾膜(0.45um)。
2) . 對抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3) . 打開(kāi)HPLC工作站(包括計算機軟件和色譜儀),連接好流動(dòng)相管道,連接檢測系統。4). 進(jìn)入HPLC控制界面主菜單,點(diǎn)擊manual,進(jìn)入手動(dòng)菜單。
4) . 有一段時(shí)間沒(méi)用,或者換了新的流動(dòng)相,需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥,需要在manual菜單下,先點(diǎn)擊purge,再點(diǎn)擊start,沖洗時(shí)速度不要超過(guò)10 ml/min。
5) . 調節流量,初次使用新的流動(dòng)相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過(guò)2000。點(diǎn)擊injure,選用合適的流速,點(diǎn)擊on,走基線(xiàn),觀(guān)察基線(xiàn)的情況。
6) . 設計走樣方法。點(diǎn)擊file,選取select users and methods,可以選取現有的各種走樣方法。若需建立一個(gè)新的方法,點(diǎn)擊new method。選取需要的配件,包括進(jìn)樣閥,泵,檢測器等,根據需要而不同。選完后,點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣方法需要包括:a.進(jìn)樣前的穩流,一般2-5分鐘;b.基線(xiàn)歸零;c.進(jìn)樣閥的loading-inject轉換;d.走樣時(shí)間,隨不同的樣品而不同。
7) . 進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法,點(diǎn)擊start。進(jìn)樣,所有的樣品均需過(guò)濾。方法走完后,點(diǎn)擊postrun,可記錄數據和做標記等。全部樣品走完后,再用上面的方法走一段基線(xiàn),洗掉剩余物。
8) . 關(guān)機時(shí),先關(guān)計算機,再關(guān)液相色譜。
9) . 填寫(xiě)登記本,由負責人簽字。
注意事項:
1) . 流動(dòng)相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動(dòng)相要小心振動(dòng)盡量不引起氣泡。
2) . 柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要讓液體過(guò)柱子。
3). 所有過(guò)柱子的液體均需嚴格的過(guò)濾。
4). 壓力不能太大,最好不要超過(guò)2000 psi。
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