LC-310高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統,樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相) 內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中做相對運動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復多次的吸附- 解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內流出,通過(guò)檢測器時(shí),樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來(lái)。HPLC廣泛應用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。
LC-310高效液相色譜儀在醫藥領(lǐng)域有作用呢?
1.藥物生產(chǎn)中進(jìn)行中間控制:生產(chǎn)抗菌素時(shí),首先要了解發(fā)酵液中的主體與付產(chǎn)物的存在情況。例如:青霉素、四環(huán)素、頭孢子菌素、紅霉素、柔紅霉素、慶大霉 素等的發(fā)酵產(chǎn)物,均可用C18柱和甲醇及緩沖液配制的流動(dòng)相或用離子對法,分析主體及其收產(chǎn)物的含量。對普魯卡因酰胺、茶堿等可進(jìn)行主體含量的測定,對硝 酸甘油可測定主體含量及其降解產(chǎn)物,以便保證藥物的熱量。
2.分離分析藥物的組分含量:由于一種藥劑常含有多組分,一次即可將各維生素B6、D1、A、E同時(shí)分離并定出含量。又如止痛藥或退燒藥也可用此法分離并測得各組分的含量。
3.測定藥物在各種器官中的代謝產(chǎn)物:特別是研究藥物的代謝產(chǎn)物在血清中存在的情況。如測血清中的酮酸及戊二酸。測尿中代謝產(chǎn)物更為方便,不需要繁鎖的預處理。因為研究尿中的組分能鑒別病人的代謝功能,對病理研究或監床診斷均具有重要的參考價(jià)值。
4.分析藥物在體內的殘量:這是近來(lái)研究新藥效能很主要的內容之一,如冬凌草甲素是植物中的一組分,有抗癌效果,但是毒性大。測定其在血清中含量很重 要,現在可用C18柱及甲醇水為流動(dòng)相,測定處理后的血清樣品,即可得到血中的含量。如磺胺類(lèi)藥品在血清及尿中含量也不允許太大,可用C18柱及酸性乙醇 為流動(dòng)相,測定含量后,則可估計最合適的用藥劑量。又如四環(huán)素、巴比妥酸、止痛藥、退燒藥、護糖尿病的藥物等,在血或尿中的含量都可用C18柱用甲醇、水 為流動(dòng)相來(lái)測定含量。因此,反相色譜法應用范圍極廣。